荷蘭PamGene公司和上海埃飛電子科技公司強(qiáng)強(qiáng)合作!為全面的激酶活性分析平臺(tái)可為廣泛的應(yīng)用提供新的機(jī)會(huì),這些應(yīng)用可洞察疾病的分子機(jī)制并導(dǎo)致發(fā)現(xiàn)生物標(biāo)志物。PamGene的許多應(yīng)用都在腫瘤學(xué)領(lǐng)域,而在神經(jīng)生物學(xué)、心血管生物學(xué)和免疫學(xué)等其他疾病領(lǐng)域也出現(xiàn)了新的應(yīng)用。
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PamGene使用專有的3D肽微陣列技術(shù)( PamChip?和PamStation?),該技術(shù)為全局激酶活性分析提供了多種方法。 該測(cè)定非常靈敏,僅需少量裂解液即可測(cè)量各種樣品(包括細(xì)胞系,異種移植物和人體組織)中激酶的活性。 從幾千個(gè)細(xì)胞中獲得的裂解物足以獲得這些樣品中存在的多種激酶的動(dòng)力學(xué)特征。這是通過(guò)將樣品裂解物與固定在微陣列3D表面上的144個(gè)酪氨酸或144個(gè)絲氨酸/蘇氨酸激酶肽底物一起孵育來(lái)實(shí)現(xiàn)的。 裂解物中存在的激酶會(huì)磷酸化肽底物,可使用熒光標(biāo)記的抗體檢測(cè)到。
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實(shí)驗(yàn)室工作流程:
激酶測(cè)定工作流程(圖3a-c)包括3個(gè)步驟:( 1)樣品制備(細(xì)胞或組織裂解); ( 2)使用我們專有的Evolve軟件進(jìn)行PamChip?檢測(cè); ( 3)使用我們專有的BioNavigator軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析和知識(shí)整合。 在測(cè)定過(guò)程中,樣品溶液被泵送通過(guò)多孔膜,從而實(shí)現(xiàn)更快的動(dòng)力學(xué)和實(shí)時(shí)測(cè)量。當(dāng)溶液在陣列下方時(shí),工作站中的CCD相機(jī)會(huì)在幾個(gè)曝光時(shí)間拍攝每個(gè)陣列的圖像(圖3d)。圖像隨后由BioNavigator?軟件使用,以生成每種肽的動(dòng)力學(xué)數(shù)據(jù)曲線(圖3c)。 使用BioNavigator?軟件執(zhí)行的數(shù)據(jù)工作流程包括圖像量化,質(zhì)量控制,統(tǒng)計(jì)分析,可視化和解釋。
該產(chǎn)品獨(dú)有的特色:
1、廣泛的覆蓋范圍– 380種磷酸用于覆蓋激酶組的大部分。2、基于激酶活性– 可以測(cè)量對(duì)激酶的直接抑制劑作用。
3、靈敏– 僅需要少量蛋白質(zhì)輸入(每個(gè)陣列0.5至5μ g),因此使該測(cè)定比其他方法更為靈敏。4、無(wú)特異性抗體– 數(shù)據(jù)質(zhì)量不依賴于磷酸抗體的特異性,因?yàn)樘禺愋栽醋?80個(gè)磷酸位點(diǎn)。
5、全長(zhǎng)激酶– 我們可以從幾種細(xì)胞系和組織的裂解物中測(cè)量全長(zhǎng)蛋白的激酶活性,而其他基于重組的激酶活性測(cè)定法則無(wú)法提供這種活性。
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